fyrirspurnbg

Sambland af terpensamböndum sem byggjast á ilmkjarnaolíum úr plöntum sem lirfudrepandi og fullorðinslyf gegn Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Þakka þér fyrir að heimsækja Nature.com.Útgáfan af vafranum sem þú notar hefur takmarkaðan CSS stuðning.Til að ná sem bestum árangri mælum við með því að þú notir nýrri útgáfu af vafranum þínum (eða slökkva á eindrægnistillingu í Internet Explorer).Í millitíðinni, til að tryggja áframhaldandi stuðning, sýnum við síðuna án stíls eða JavaScript.
Samsetningar skordýraeyðandi efnasambanda úr plöntum geta sýnt samverkandi eða andstæð víxlverkun gegn meindýrum.Í ljósi hraðrar útbreiðslu sjúkdóma sem Aedes moskítóflugur bera og aukins viðnáms Aedes moskítóstofna gegn hefðbundnum skordýraeitri, voru tuttugu og átta samsetningar af terpensamböndum byggðar á ilmkjarnaolíum úr plöntum mótaðar og prófaðar gegn lirfu- og fullorðinsstigum Aedes aegypti.Fimm ilmkjarnaolíur úr plöntum (EOs) voru upphaflega metnar með tilliti til lirfudrepandi og fullorðinna virkni, og tvö helstu efnasambönd voru auðkennd í hverju EO byggt á GC-MS niðurstöðum.Keypt voru helstu auðkenndu efnasamböndin, þ.e. díallyldísúlfíð, díalýltrísúlfíð, karvón, límónen, eugenól, metýl eugenól, eucalyptol, eudesmol og moskító alfa-pinen.Tvöfaldar samsetningar þessara efnasambanda voru síðan útbúnar með því að nota undirdrepandi skammta og samverkandi og andstæð áhrif þeirra voru prófuð og ákvörðuð.Bestu lirfudrepandi samsetningarnar eru fengnar með því að blanda limonene við díallyldísúlfíð og bestu fullorðinsdrepandi samsetningarnar eru fengnar með því að blanda karvoni við limonene.Tilbúna lirfulyfið Temphos sem notað er í atvinnuskyni og fullorðinslyfið Malathion voru prófuð sérstaklega og í tvöföldum samsetningum með terpenoids.Niðurstöðurnar sýndu að samsetning temephos og diallyl disúlfíðs og malathion og eudesmol var áhrifaríkasta samsetningin.Þessar öflugu samsetningar eiga möguleika á notkun gegn Aedes aegypti.
Ilmkjarnaolíur úr plöntum (EOs) eru afleidd umbrotsefni sem innihalda ýmis lífvirk efnasambönd og verða sífellt mikilvægari sem valkostur við tilbúið skordýraeitur.Þau eru ekki aðeins umhverfisvæn og notendavæn, heldur eru þau einnig blanda af mismunandi lífvirkum efnasamböndum, sem dregur einnig úr líkum á að þróa lyfjaónæmi1.Með því að nota GC-MS tækni, rannsökuðu vísindamenn innihaldsefni ýmissa ilmkjarnaolíur úr plöntum og greindust meira en 3.000 efnasambönd úr 17.500 arómatískum plöntum2, sem flestar voru prófaðar með tilliti til skordýraeiturs og greint er frá því að þær hafi skordýraeyðandi áhrif3,4.Sumar rannsóknir sýna að eituráhrif aðalþáttar efnasambandsins eru þau sömu og eða meiri en á hráu etýlenoxíði þess.En notkun einstakra efnasambanda getur aftur gefið svigrúm fyrir þróun ónæmis, eins og raunin er með efnafræðileg skordýraeitur5,6.Þess vegna er núverandi áhersla lögð á að útbúa blöndur af efnasamböndum sem byggjast á etýlenoxíði til að bæta skordýraeyðandi virkni og draga úr líkum á mótstöðu í meindýrahópum.Einstök virk efnasambönd sem eru til staðar í EO geta sýnt samverkandi eða andstæð áhrif í samsetningum sem endurspegla heildarvirkni EO, staðreynd sem hefur verið lögð áhersla á í rannsóknum sem gerðar voru af fyrri vísindamönnum7,8.Vektorstýringarforritið inniheldur einnig EO og íhluti þess.Moskítódrepandi virkni ilmkjarnaolíanna hefur verið mikið rannsökuð á Culex og Anopheles moskítóflugum.Nokkrar rannsóknir hafa reynt að þróa áhrifarík varnarefni með því að sameina ýmsar plöntur með tilbúnum skordýraeitri sem notuð eru í atvinnuskyni til að auka heildar eiturhrif og lágmarka aukaverkanir9.En rannsóknir á slíkum efnasamböndum gegn Aedes aegypti eru enn sjaldgæfar.Framfarir í læknavísindum og þróun lyfja og bóluefna hafa hjálpað til við að berjast gegn sumum smitsjúkdómum.En tilvist mismunandi sermisgerða veirunnar, sem smitast af Aedes aegypti moskítóflugunni, hefur leitt til þess að bólusetningaráætlunum hefur mistekist.Þess vegna, þegar slíkir sjúkdómar koma fram, eru smitvarnir eini kosturinn til að koma í veg fyrir útbreiðslu sjúkdómsins.Í núverandi atburðarás er eftirlit með Aedes aegypti mjög mikilvægt þar sem það er lykilferjur ýmissa vírusa og sermisgerða þeirra sem valda dengue hita, Zika, dengue blæðandi hita, gulu, osfrv. Það sem er athyglisvert er sú staðreynd að fjöldi Tilfellum af næstum öllum smitberum Aedes-sjúkdómum fjölgar á hverju ári í Egyptalandi og fjölgar um allan heim.Þess vegna, í þessu samhengi, er brýn þörf á að þróa umhverfisvænar og árangursríkar eftirlitsráðstafanir fyrir Aedes aegypti stofna.Hugsanlegir frambjóðendur í þessu sambandi eru EOs, efnasambönd þeirra og samsetningar þeirra.Þess vegna reyndi þessi rannsókn að bera kennsl á árangursríkar samverkandi samsetningar EO efnasambanda úr plöntum úr fimm plöntum með skordýraeyðandi eiginleika (þ.e. myntu, helga basil, tröllatré, Allium sulfur og melaleuca) gegn Aedes aegypti.
Öll valin EO sýndu mögulega lirfudrepandi virkni gegn Aedes aegypti með 24 klst LC50 á bilinu 0,42 til 163,65 ppm.Mesta lirfudrepandi virkni var skráð fyrir piparmyntu (Mp) EO með LC50 gildi 0,42 ppm eftir 24 klst., fylgt eftir með hvítlauk (As) með LC50 gildi 16,19 ppm eftir 24 klst (tafla 1).
Að Ocimum Sainttum, Os EO undanskildum, sýndu öll hin fjögur skimuðu EO augljós ofnæmisdrepandi áhrif, með LC50 gildi á bilinu 23,37 til 120,16 ppm yfir 24 klst útsetningartímabilið.Thymophilus striata (Cl) EO var áhrifaríkust við að drepa fullorðna með LC50 gildið 23,37 ppm innan 24 klukkustunda frá útsetningu, þar á eftir Eucalyptus maculata (Em) sem hafði LC50 gildið 101,91 ppm (tafla 1).Á hinn bóginn hefur LC50 gildi fyrir Os ekki enn verið ákvarðað þar sem hæsta dánartíðni, 53%, var skráð við hæsta skammtinn (viðbótarmynd 3).
Tvö helstu innihaldsefnasamböndin í hverri EO voru auðkennd og valin á grundvelli NIST bókasafnsgagnagrunnsniðurstaðna, GC litningasvæðishlutfalls og MS litrófsniðurstöðum (tafla 2).Fyrir EO As voru helstu efnasamböndin sem voru auðkennd díallyldísúlfíð og díallyltrísúlfíð;fyrir EO Mp voru helstu efnasamböndin sem voru auðkennd carvone og limonene, fyrir EO Em voru helstu efnasamböndin sem greind voru eudesmol og eucalyptol;Fyrir EO Os voru helstu efnasamböndin sem greind voru eugenol og metýl eugenol og fyrir EO Cl voru helstu efnasamböndin sem greind voru eugenol og α-pinene (mynd 1, aukamyndir 5–8, viðbótartafla 1–5).
Niðurstöður massagreiningar á helstu terpenóíðum valinna ilmkjarnaolía (A-diallyldísúlfíð; B-diallyl þrísúlfíð; C-eugenol; D-metýl eugenol; E-limonene; F-arómatísk ceperone; G-α-pinene; H-cineole ; R-eudamól).
Alls voru níu efnasambönd (diallyl disulfide, diallyl trisulfide, eugenol, methyl eugenol, carvone, limonene, eucalyptol, eudesmol, α-pinene) auðkennd sem áhrifarík efnasambönd sem eru helstu efnisþættir EO og voru hver fyrir sig lífmæld gegn Aedes aegypti á lirfu stigum..Efnasambandið eudesmol hafði mesta lirfudrepandi virkni með LC50 gildi upp á 2,25 ppm eftir 24 klst útsetningu.Efnasamböndin díallyldísúlfíð og díalýltrísúlfíð hafa einnig reynst hafa möguleg lirfudrepandi áhrif, með meðalskammta undir banvænni á bilinu 10–20 ppm.Í meðallagi lirfudrepandi virkni kom aftur fram fyrir efnasamböndin eugenol, limonene og eucalyptol með LC50 gildi upp á 63,35 ppm, 139,29 ppm.og 181,33 ppm eftir 24 klukkustundir, í sömu röð (tafla 3).Hins vegar fannst engin marktæk lirfudrepandi möguleiki metýleugenóls og karvóns, jafnvel við hæstu skammta, svo LC50 gildi voru ekki reiknuð út (tafla 3).Tilbúið lirfueyðandi Temephos hafði meðal banvænan styrk upp á 0,43 ppm gegn Aedes aegypti á 24 klukkustunda útsetningu (tafla 3, viðbótartafla 6).
Sjö efnasambönd (diallyl disulfide, diallyl trisulfide, eucalyptol, α-pinene, eudesmol, limonene og carvone) voru auðkennd sem helstu efnasambönd virks EO og voru prófuð hvert fyrir sig gegn fullorðnum egypskum Aedes moskítóflugum.Samkvæmt Probit aðhvarfsgreiningu reyndist Eudesmol hafa hæsta möguleika með LC50 gildi upp á 1,82 ppm, fylgt eftir með Eucalyptol með LC50 gildi 17,60 ppm við 24 klst útsetningartíma.Hin fimm efnasambönd sem voru prófuð voru í meðallagi skaðleg fullorðnum með LC50s á bilinu 140,79 til 737,01 ppm (tafla 3).Tilbúið lífrænt fosfórmalathion var minna öflugt en eudesmol og hærra en hin sex efnasamböndin, með LC50 gildi 5,44 ppm yfir 24 klst útsetningartímabilið (tafla 3, viðbótartafla 6).
Sjö öflug blýefnasambönd og lífrænt fosfórtamfosat voru valin til að móta tvöfaldar samsetningar af LC50 skömmtum þeirra í hlutfallinu 1:1.Alls voru 28 tvöfaldar samsetningar útbúnar og prófaðar með tilliti til lirfudrepandi verkunar gegn Aedes aegypti.Níu samsetningar reyndust samverkandi, 14 samsetningar voru andstæð og fimm samsetningar voru ekki lirfudrepandi.Meðal samverkandi samsetninga var samsetning díallyldísúlfíðs og temofols áhrifaríkust, en 100% dánartíðni sást eftir 24 klukkustundir (tafla 4).Á sama hátt sýndu blöndur af limóneni með díallyldísúlfíði og eugenóli með týmetfos góða möguleika með 98,3% lirfudauða (tafla 5).Hinar 4 samsetningarnar, þ.e. eudesmol plús eucalyptol, eudesmol plús limonene, eucalyptol plús alfa-pinene, alfa-pinene plús temephos, sýndu einnig marktæka lirfudrepandi verkun, þar sem dánartíðni var yfir 90%.Áætluð dánartíðni er nálægt 60-75%.(Tafla 4).Hins vegar sýndi samsetning limónens með α-pinene eða tröllatré andstæð viðbrögð.Sömuleiðis hafa blöndur af Temephos með eugenol eða eucalyptus eða eudesmol eða diallyl trisulfide reynst hafa andstæð áhrif.Sömuleiðis er samsetning díallyldísúlfíðs og díalýltrísúlfíðs og samsetning annars hvors þessara efnasambanda við eudesmol eða eugenól andstæð í lirfudrepandi verkun þeirra.Einnig hefur verið greint frá andstöðu við samsetningu eudesmols og eugenóls eða α-pineni.
Af öllum 28 tvíblöndum sem prófaðar voru með tilliti til sýruvirkni fullorðinna voru 7 samsetningar samverkandi, 6 höfðu engin áhrif og 15 voru mótvirkar.Blöndur af eudesmol með tröllatré og limonene með karvon reyndust vera áhrifaríkari en aðrar samverkandi samsetningar, með dánartíðni eftir 24 klst. 76% og 100%, í sömu röð (tafla 5).Sýnt hefur verið fram á að malatíon hefur samverkandi áhrif með öllum samsetningum efnasambanda nema limóneni og díallyltrísúlfíði.Á hinn bóginn hefur mótvægi fundist á milli díallyldísúlfíðs og díalýltrísúlfíðs og samsetningar annars hvors þeirra við tröllatré, eða tröllatré, eða karvón eða límónen.Á sama hátt sýndu samsetningar af α-pinene með eudesmol eða limonene, eucalyptol með carvone eða limonene, og limonene með eudesmol eða malathion andstæð lirfudrepandi áhrif.Fyrir hinar sex samsetningarnar, var enginn marktækur munur á væntanlegri og dánartíðni (tafla 5).
Á grundvelli samlegðaráhrifa og skammta sem eru undir banvænni, var lirfudrepandi eituráhrif þeirra gegn miklum fjölda Aedes aegypti moskítóflugna að lokum valin og prófuð frekar.Niðurstöðurnar sýndu að lirfudauði sem sást var með því að nota tvíhliða samsetningar eugenol-limonene, diallyldisulfide-limonene og diallyldisulfide-timephos var 100%, en væntanlegur lirfudauði var 76,48%, 72,16% og 63,4%, í sömu röð (tafla 6)..Samsetning limónens og eudesmols var hlutfallslega minni árangursrík, þar sem 88% lirfudauði sást á 24 klukkustunda útsetningartímabilinu (tafla 6).Í stuttu máli sýndu fjórar valdar tvöfaldar samsetningarnar einnig samverkandi lirfudrepandi áhrif gegn Aedes aegypti þegar þær voru notaðar í stórum stíl (tafla 6).
Þrjár samverkandi samsetningar voru valdar fyrir fullorðinsdrepandi lífgreiningu til að stjórna stórum hópum fullorðinna Aedes aegypti.Til að velja samsetningar til að prófa á stórum skordýrabyggðum lögðum við fyrst áherslu á tvær bestu samverkandi terpensamsetningarnar, nefnilega carvone plús limonene og eucalyptol plús eudesmol.Í öðru lagi var besta samverkandi samsetningin valin úr blöndu af tilbúnu lífrænu fosfati malathion og terpenoids.Við teljum að samsetning malathion og eudesmol sé besta samsetningin til að prófa stórar skordýrabyggðir vegna hæsta dánartíðni sem sést og mjög lágs LC50 gildi umsækjenda innihaldsefna.Malathion sýnir samvirkni í samsetningu með α-pineni, diallyldísúlfíði, tröllatré, carvone og eudesmol.En ef við skoðum LC50 gildin þá er Eudesmol með lægsta gildið (2,25 ppm).Reiknuð LC50 gildi fyrir malathion, α-pinene, diallyldisulfide, eucalyptol og carvone voru 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 og 140,79 ppm.í sömu röð.Þessi gildi gefa til kynna að samsetning malathion og eudesmols sé ákjósanlegasta samsetningin hvað varðar skammta.Niðurstöðurnar sýndu að samsetningarnar af karvóni ásamt limóneni og eudesmóli ásamt malaþíoni höfðu 100% dánartíðni samanborið við væntan dánartíðni upp á 61% til 65%.Önnur samsetning, eudesmol ásamt eucalyptol, sýndi dánartíðni upp á 78,66% eftir 24 klst.Allar þrjár valdar samsetningar sýndu samverkandi áhrif jafnvel þegar þær voru notaðar í stórum stíl gegn fullorðnum Aedes aegypti (tafla 6).
Í þessari rannsókn sýndu valin EO plantna eins og Mp, As, Os, Em og Cl lofandi banvæn áhrif á lirfu- og fullorðinsstig Aedes aegypti.Mp EO hafði mesta lirfudrepandi virkni með LC50 gildi 0,42 ppm, síðan As, Os og Em EOs með LC50 gildi minna en 50 ppm eftir 24 klst.Þessar niðurstöður eru í samræmi við fyrri rannsóknir á moskítóflugum og öðrum tvíflugum10,11,12,13,14.Þrátt fyrir að lirfudrepandi styrkleiki Cl sé lægri en annarra ilmkjarnaolíur, með LC50 gildið 163,65 ppm eftir 24 klst., þá er fullorðinsgeta þess hæst með LC50 gildið 23,37 ppm eftir 24 klst.Mp, As og Em EO sýndu einnig góða ofnæmisdrepandi möguleika með LC50 gildi á bilinu 100–120 ppm við 24 klst. útsetningu, en voru tiltölulega lægri en lirfudrepandi verkun þeirra.Á hinn bóginn sýndu EO Os hverfandi ofnæmisdrepandi áhrif jafnvel við hæsta meðferðarskammt.Þannig benda niðurstöðurnar til þess að eituráhrif etýlenoxíðs á plöntur geti verið mismunandi eftir þroskastigi moskítóflugna15.Það fer einnig eftir því hversu hratt EOs komast inn í líkama skordýrsins, samspili þeirra við ákveðin markensím og afeitrunargetu moskítóflugunnar á hverju þroskastigi16.Mikill fjöldi rannsókna hefur sýnt að aðalefnisefnasambandið er mikilvægur þáttur í líffræðilegri virkni etýlenoxíðs, þar sem það er meirihluti heildarefnasambandanna3,12,17,18.Þess vegna töldum við tvö aðalefnasambönd í hverju EO.Byggt á GC-MS niðurstöðum voru díallyldísúlfíð og díallyltrísúlfíð auðkennd sem helstu efnasambönd EO As, sem er í samræmi við fyrri skýrslur19,20,21.Þrátt fyrir að fyrri skýrslur hafi gefið til kynna að mentól væri eitt helsta efnasamband þess, voru karvón og límónen aftur auðkennd sem aðalefnasambönd Mp EO22,23.Samsetningarsnið Os EO sýndi að eugenól og metýleugenól eru helstu efnasamböndin, sem er svipað og niðurstöður fyrri vísindamanna16,24.Greint hefur verið frá eucalyptol og eucalyptol sem helstu efnasamböndin sem eru til staðar í Em laufolíu, sem er í samræmi við niðurstöður sumra vísindamanna25,26 en andstætt niðurstöðum Olalade et al.27.Yfirburði cineole og α-pinene kom fram í melaleuca ilmkjarnaolíu, sem er svipað og fyrri rannsóknir28,29.Greint hefur verið frá innansértækum mun á samsetningu og styrk ilmkjarnaolíum sem unnar eru úr sömu plöntutegundum á mismunandi stöðum og sást einnig í þessari rannsókn, sem er undir áhrifum af landfræðilegum vaxtarskilyrðum plantna, uppskerutíma, þroskastigi eða plöntualdri.framkoma efnagerða o.s.frv.22,30,31,32.Lykilgreind efnasambönd voru síðan keypt og prófuð með tilliti til lirfudrepandi áhrifa þeirra og áhrifa á fullorðnar Aedes aegypti moskítóflugur.Niðurstöðurnar sýndu að lirfudrepandi virkni díallyldísúlfíðs var sambærileg við óhreinsað EO As.En virkni diallyl trísúlfíðs er meiri en EO As.Þessar niðurstöður eru svipaðar þeim sem Kimbaris o.fl.33 á Culex á Filippseyjum.Hins vegar sýndu þessi tvö efnasambönd ekki góða sjálfvirka virkni gegn markmoskítóflugunum, sem er í samræmi við niðurstöður Plata-Rueda et al 34 um Tenebrio molitor.Os EO er áhrifaríkt gegn lirfustigi Aedes aegypti, en ekki gegn fullorðinsstigi.Það hefur verið staðfest að lirfudrepandi virkni helstu einstakra efnasambanda er minni en óhreinsaðs Os EO.Þetta felur í sér hlutverk fyrir önnur efnasambönd og víxlverkun þeirra í hráu etýlenoxíði.Metýl eugenól eitt sér hefur hverfandi virkni, en eugenól eitt og sér hefur miðlungsmikla virkni lirfu.Þessi niðurstaða staðfestir annars vegar 35,36 og stangast hins vegar á við niðurstöður fyrri vísindamanna37,38.Mismunur á virknihópum eugenóls og metýleugenóls getur leitt til mismunandi eiturverkana á sama markskordýrið39.Límónen reyndist hafa miðlungsmikla lirfudrepandi virkni en áhrif karvóns voru óveruleg.Á sama hátt styðja tiltölulega lítil eituráhrif limónens á fullorðin skordýr og mikil eituráhrif karvóns niðurstöður sumra fyrri rannsókna40 en stangast á við aðrar41.Tilvist tvítengja í bæði innanhringlaga og utanhringlaga stöðu getur aukið ávinning þessara efnasambanda sem lirfuefna3,41, á meðan karvón, sem er ketón með ómettuðum alfa- og beta-kolefnum, getur sýnt meiri hættu á eiturverkunum hjá fullorðnum42.Hins vegar eru einstakir eiginleikar limónens og karvóns mun lægri en heildar EO Mp (tafla 1, tafla 3).Meðal terpenoids sem prófuð voru kom í ljós að eudesmol hafði mesta lirfudrepandi og fullorðinsvirkni með LC50 gildi undir 2,5 ppm, sem gerir það að efnilegu efnasambandi til að hafa stjórn á Aedes moskítóflugum.Frammistaða þess er betri en alls EO Em, þó það sé ekki í samræmi við niðurstöður Cheng o.fl.40.Eudesmol er seskvíterpen með tveimur ísópreneiningum sem er minna rokgjarnt en súrefnisbundin mónóterpen eins og tröllatré og hefur því meiri möguleika sem varnarefni.Tröllatré sjálft hefur meiri virkni fullorðinna en lirfudrepandi, og niðurstöður úr fyrri rannsóknum bæði styðja og hrekja þetta37,43,44.Virknin ein og sér er nánast sambærileg við allt EO Cl.Annað tvíhringlaga mónóterpen, α-pinen, hefur minni fullorðinsáhrif á Aedes aegypti en lirfudrepandi áhrif, sem er andstæða áhrifa fulls EO Cl.Heildar skordýraeyðandi virkni terpenoids er undir áhrifum af fitusækni þeirra, rokgjarnleika, kolefnisgreinum, útvarpssvæði, yfirborðsflatarmáli, virkum hópum og stöðu þeirra45,46.Þessi efnasambönd geta virkað með því að eyðileggja frumusöfnun, hindra öndunarvirkni, trufla flutning taugaboða osfrv. 47 Tilbúið lífrænt fosfat Temephos reyndist hafa mesta lirfudrepandi virkni með LC50 gildið 0,43 ppm, sem er í samræmi við gögn Lek - Utala48.Fullorðinsvirkni hins tilbúna lífræna fosfórs malathion var tilkynnt við 5,44 ppm.Þrátt fyrir að þessi tvö lífrænu fosföt hafi sýnt hagstæð svörun gegn rannsóknarstofum af Aedes aegypti, hefur verið greint frá moskítóþoli gegn þessum efnasamböndum á mismunandi stöðum í heiminum49.Hins vegar hafa ekki fundist svipaðar skýrslur um þróun ónæmis gegn jurtalyfjum50.Þannig er litið á grasafræði sem hugsanlega valkost við efnafræðileg varnarefni í eftirlitsáætlunum með smitberum.
Lirfueyðandi áhrifin voru prófuð á 28 tvöföldum samsetningum (1:1) sem voru unnin úr öflugum terpenóíðum og terpenóíðum með thymetphos, og 9 samsetningar reyndust samverkandi, 14 mótvirkar og 5 mótvirkar.Engin áhrif.Á hinn bóginn, í lífgreiningu fullorðinna, reyndust 7 samsetningar hafa samverkandi áhrif, 15 samsetningar voru mótvirkar og 6 samsetningar höfðu engin áhrif.Ástæðan fyrir því að ákveðnar samsetningar valda samverkandi áhrifum getur verið vegna þess að umsækjenda efnasamböndin hafa samskipti samtímis á mismunandi mikilvægum ferlum, eða vegna raðhömlunar á mismunandi lykilensímum tiltekinnar líffræðilegrar ferils51.Í ljós kom að samsetning limónens og díallyldísúlfíðs, tröllatrés eða eugenóls var samverkandi bæði í litlum og stórum stíl (tafla 6), en samsetning þess við tröllatré eða α-pinene reyndist hafa andstæð áhrif á lirfur.Að meðaltali virðist limónen vera góður samverkandi, mögulega vegna nærveru metýlhópa, góðrar inndælingar inn í hornlag og mismunandi verkunarmáta52,53.Áður hefur verið greint frá því að limónen getur valdið eiturverkunum með því að komast í gegnum skordýraeiturbönd (snertieitrun), hafa áhrif á meltingarkerfið (fóðurlyf) eða haft áhrif á öndunarfærin (fræsingarvirkni), 54 á meðan fenýlprópanóíð eins og eugenól geta haft áhrif á efnaskiptaensím 55. Þess vegna geta samsetningar efnasambanda með mismunandi verkunarhátt aukið heildar banvæn áhrif blöndunnar.Eucalyptol reyndist vera samverkandi með díallyldísúlfíði, tröllatré eða α-pineni, en aðrar samsetningar með öðrum efnasamböndum voru annað hvort ekki lirfudrepandi eða mótvirkar.Fyrstu rannsóknir sýndu að eucalyptol hefur hamlandi virkni á asetýlkólínesterasa (AChE), sem og oktaamín og GABA viðtaka56.Þar sem hringlaga monoterpenes, eucalyptol, eugenol, o.s.frv. geta haft sama verkunarmáta og taugaeiturvirkni þeirra, 57 og lágmarkar þannig samsett áhrif þeirra með gagnkvæmri hömlun.Sömuleiðis reyndist samsetning Temephos með díallyldísúlfíði, α-pineni og límóneni vera samverkandi, sem styður fyrri fregnir um samverkandi áhrif á milli jurtaafurða og tilbúinna lífrænna fosfata58.
Samsetning eudesmols og eucalyptols reyndist hafa samverkandi áhrif á lirfu- og fullorðinsstig Aedes aegypti, hugsanlega vegna mismunandi verkunarmáta þeirra vegna mismunandi efnafræðilegrar uppbyggingar.Eudesmol (seskvíterpen) getur haft áhrif á öndunarfæri 59 og eucalyptol (mónóterpen) getur haft áhrif á asetýlkólínesterasa 60 .Samhliða útsetning innihaldsefna á tveimur eða fleiri markstöðum getur aukið banvæn áhrif samsetningarinnar.Í lífgreiningum á fullorðnum efnum reyndist malathion vera samverkandi við carvone eða eucalyptol eða eucalyptol eða diallyldisulfide eða α-pinene, sem gefur til kynna að það sé samverkandi með því að bæta við limonene og di.Góð samverkandi ofnæmislyf fyrir allt safn terpenefnasambanda, að undanskildu allýltrísúlfíði.Thangam og Kathiresan61 greindu einnig frá svipuðum niðurstöðum um samverkandi áhrif malathion með jurtaseyði.Þessi samverkandi svörun gæti stafað af samsettum eituráhrifum malathion og plöntuefna á skordýraeitrandi ensím.Lífræn fosföt eins og malathion virka almennt með því að hindra cýtókróm P450 esterasa og mónóoxýgenasa62,63,64.Þess vegna getur það aukið banvæn áhrif á moskítóflugur að sameina malathion með þessum verkunarháttum og terpenes með mismunandi verkunarháttum.
Á hinn bóginn gefur andstæðingur til kynna að valin efnasambönd séu minna virk í samsetningu en hvert efnasamband eitt sér.Ástæðan fyrir andstöðu í sumum samsetningum getur verið sú að eitt efnasambandið breytir hegðun hins efnasambandsins með því að breyta frásogshraða, dreifingu, efnaskiptum eða útskilnaði.Fyrstu vísindamenn töldu þetta vera orsök andstæðinga í lyfjasamsetningum.Sameindir Mögulegur verkunarháttur 65. Á sama hátt geta mögulegar orsakir andstæðna tengst svipuðum verkunarháttum, samkeppni efnasambanda um sama viðtaka eða markstað.Í sumum tilfellum getur hömlun á markpróteininu einnig átt sér stað án samkeppni.Í þessari rannsókn sýndu tvö lífræn brennisteinssambönd, díallyldísúlfíð og díalýltrísúlfíð, andstæð áhrif, hugsanlega vegna samkeppni um sama marksvæði.Sömuleiðis sýndu þessi tvö brennisteinssambönd andstæð áhrif og höfðu engin áhrif þegar þau voru sameinuð eudesmol og α-pinene.Eudesmol og alfa-pinene eru hringlaga að eðlisfari, en díalýl tvísúlfíð og díallyltrísúlfíð eru alifatísk í eðli sínu.Byggt á efnafræðilegri uppbyggingu ætti samsetning þessara efnasambanda að auka heildar banvæna virkni þar sem marksvæði þeirra eru venjulega mismunandi34,47, en í tilraunaskyni fundum við andstæðingur, sem gæti stafað af hlutverki þessara efnasambanda í sumum óþekktum lífverum in vivo.kerfi vegna samskipta.Á sama hátt framkallaði samsetning cineole og α-pinene andstæð svör, þó að vísindamenn hafi áður greint frá því að efnasamböndin tvö hafi mismunandi verkunarmarkmið47,60.Þar sem bæði efnasamböndin eru hringlaga mónóterpenar geta verið nokkrir algengir markstaðir sem geta keppt um bindingu og haft áhrif á heildareiturhrif samsettu pöranna sem rannsökuð eru.
Byggt á LC50 gildum og dánartíðni sem mælst hefur, voru tvær bestu samverkandi terpensamsetningarnar valdar, nefnilega pörin af carvone + limonene og eucalyptol + eudesmol, sem og tilbúið lífrænt fosfór malathion með terpenum.Ákjósanlegasta samverkandi samsetning malathion + Eudesmol efnasambanda var prófuð í lífgreiningu á skordýraeitri fyrir fullorðna.Miðaðu á stórar skordýrabyggðir til að staðfesta hvort þessar árangursríku samsetningar geti virkað gegn miklum fjölda einstaklinga yfir tiltölulega stórum útsetningarrýmum.Allar þessar samsetningar sýna fram á samverkandi áhrif gegn stórum skordýrasveimum.Svipaðar niðurstöður fengust fyrir bestu samverkandi lirfudrepandi samsetningu sem var prófuð gegn stórum stofnum Aedes aegypti lirfa.Þannig má segja að áhrifarík samverkandi lirfudrepandi og fullorðinsdrepandi samsetning EO efnasambanda úr plöntum sé sterkur frambjóðandi gegn núverandi tilbúnum efnum og hægt sé að nota frekar til að stjórna Aedes aegypti stofnum.Sömuleiðis er einnig hægt að nota áhrifaríkar samsetningar gerviefna lirfueyða eða fullorðinseyða með terpenum til að draga úr skömmtum af thymetphos eða malathion sem er gefið moskítóflugum.Þessar öflugu samverkandi samsetningar gætu veitt lausnir fyrir framtíðarrannsóknir á þróun lyfjaónæmis í Aedes moskítóflugum.
Eggjum af Aedes aegypti var safnað frá Regional Medical Research Centre, Dibrugarh, Indian Council of Medical Research og haldið undir stýrðu hitastigi (28 ± 1 °C) og rakastigi (85 ± 5%) í dýrafræðideild Gauhati háskólans undir stjórn. eftirfarandi skilyrði: Arivoli var lýst o.fl.Eftir útungun var lirfum gefið lirfumat (hundakexduft og ger í 3:1 hlutfalli) og fullorðnum var gefið 10% glúkósalausn.Frá og með 3. degi eftir uppkomu var fullorðnum kvenkyns moskítóflugum leyft að sjúga blóð albínórottna.Bleytið síupappír í vatni í glasi og setjið í eggjavarpsbúrið.
Valin plöntusýni, þ.e. tröllatré (Myrtaceae), heilög basil (Lamiaceae), mynta (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) og allium perur (Amaryllidaceae).Safnað frá Guwahati og auðkennt af grasafræðideild Gauhati háskólans.Plöntusýnin sem safnað var (500 g) voru sett í vatnseimingu með því að nota Clevenger tæki í 6 klukkustundir.Útdregnu EO var safnað í hrein hettuglös úr gleri og geymd við 4°C til frekari rannsókna.
Eituráhrif á lirfudrep voru rannsökuð með því að nota örlítið breyttar staðlaðar verklagsreglur Alþjóðaheilbrigðismálastofnunarinnar 67 .Notaðu DMSO sem ýruefni.Hver EO styrkur var upphaflega prófaður við 100 og 1000 ppm og afhjúpaði 20 lirfur í hverri endurtekningu.Byggt á niðurstöðunum var styrktarbil beitt og dánartíðni skráð frá 1 klst. til 6 klst. (með 1 klst. millibili) og 24 klst., 48 klst. og 72 klst. eftir meðferð.Dánarstyrkur (LC50) var ákvarðaður eftir 24, 48 og 72 klst.Hver styrkur var mældur í þrígang ásamt einum neikvæðri samanburði (aðeins vatn) og einum jákvæðum samanburði (DMSO-meðhöndlað vatn).Ef púpa á sér stað og meira en 10% af lirfum samanburðarhópsins deyja er tilraunin endurtekin.Ef dánartíðni í samanburðarhópnum er á bilinu 5-10%, notaðu Abbott leiðréttingarformúluna 68.
Aðferðin sem Ramar o.fl.69 var notað í lífgreiningu fyrir fullorðna gegn Aedes aegypti með asetoni sem leysi.Hver EO var upphaflega prófuð gegn fullorðnum Aedes aegypti moskítóflugum í styrkleikanum 100 og 1000 ppm.Berið 2 ml af hverri tilbúinni lausn á Whatman-númerið.1 stykki af síupappír (stærð 12 x 15 cm2) og látið asetonið gufa upp í 10 mínútur.Síupappír meðhöndlaður með aðeins 2 ml af asetoni var notaður sem viðmið.Eftir að asetonið hefur gufað upp er meðhöndlaði síupappírinn og viðmiðunarsíupappírinn settur í sívalt rör (10 cm djúpt).Tíu 3 til 4 daga gamlar moskítóflugur sem ekki voru blóðfóðraðar voru fluttar í þrefalt af hverjum styrk.Byggt á niðurstöðum forprófana var mismunandi styrkur af völdum olíum prófaður.Dánartíðni var skráð 1 klst., 2 klst., 3 klst., 4 klst., 5 klst., 6 klst., 24 klst., 48 klst. og 72 klst. eftir losun moskítóflugna.Reiknaðu LC50 gildi fyrir útsetningartíma 24 klukkustundir, 48 klukkustundir og 72 klukkustundir.Ef dánartíðni samanburðarlotunnar fer yfir 20% skal endurtaka allt prófið.Sömuleiðis, ef dánartíðni í samanburðarhópnum er meiri en 5%, skaltu stilla niðurstöðurnar fyrir meðhöndluðu sýnin með formúlu Abbott68.
Gasskiljun (Agilent 7890A) og massagreining (Accu TOF GCv, Jeol) voru framkvæmd til að greina efnasambönd valinna ilmkjarnaolíanna.GC var útbúinn með FID skynjara og háræðasúlu (HP5-MS).Flutningsgasið var helíum, flæðihraði var 1 ml/mín.GC forritið stillir Allium sativum á 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M og Ocimum Sainttum á 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, fyrir myntu 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, fyrir tröllatré 20,60-1M-10-200-3M-30-280, og fyrir rauða Fyrir þúsund lög eru þeir þeir 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Helstu efnasambönd hvers EO voru auðkennd á grundvelli svæðishlutfalls sem reiknað var út frá GC litskiljuninni og niðurstöðum massagreininga (vísað í NIST 70 staðla gagnagrunninn).
Tvö helstu efnasamböndin í hverju EO voru valin út frá GC-MS niðurstöðum og keypt af Sigma-Aldrich með 98–99% hreinleika til frekari lífgreininga.Efnasamböndin voru prófuð með tilliti til lirfudrepandi verkunar og fullorðinna gegn Aedes aegypti eins og lýst er hér að ofan.Algengustu gervi lirfueyðin tamefosat (Sigma Aldrich) og fullorðinslyfið malathion (Sigma Aldrich) voru greind til að bera saman virkni þeirra við valin EO efnasambönd, eftir sömu aðferð.
Tvöfaldur blöndur af völdum terpensamböndum og terpensamböndum ásamt lífrænum fosfötum í verslunum (tilephos og malathion) voru útbúnar með því að blanda LC50 skammtinum af hverju umsækjandi efnasambandi í hlutfallinu 1:1.Tilbúnar samsetningar voru prófaðar á lirfu- og fullorðinsstigum Aedes aegypti eins og lýst er hér að ofan.Hver lífgreining var gerð í þríriti fyrir hverja samsetningu og í þríriti fyrir einstök efnasambönd sem voru til staðar í hverri samsetningu.Dauði markskordýra var skráður eftir 24 klst.Reiknaðu væntanlega dánartíðni fyrir tvöfalda blöndu með því að nota eftirfarandi formúlu.
þar sem E = væntanleg dánartíðni Aedes aegypti moskítóflugna sem svar við tvíundarsamsetningu, þ.e. tengingu (A + B).
Áhrif hverrar tvöfaldrar blöndu voru merkt sem samverkandi, andstæð eða engin áhrif byggð á χ2 gildinu sem reiknað er með aðferðinni sem Pavla52 lýsti.Reiknaðu χ2 gildið fyrir hverja samsetningu með eftirfarandi formúlu.
Áhrif samsetningar voru skilgreind sem samverkandi þegar reiknað χ2 gildi var hærra en töflugildi fyrir samsvarandi frelsisgráður (95% öryggisbil) og ef sá dánartíðni reyndist vera meiri en búist var við.Á sama hátt, ef reiknað χ2 gildi fyrir einhverja samsetningu fer yfir töflugildið með einhverjum frelsisgráðum, en dánartíðni sem sést er lægri en áætlaður dánartíðni, er meðferðin talin andstæð.Og ef í einhverri samsetningu er reiknað gildi χ2 minna en töflugildið í samsvarandi frelsisgráðum, er samsetningin talin hafa engin áhrif.
Þrjár til fjórar samverkandi samsetningar (100 lirfur og 50 lirfudrepandi og fullorðnar skordýravirkni) voru valdar til að prófa gegn miklum fjölda skordýra.Fullorðnir) halda áfram eins og að ofan.Samhliða blöndunum voru einstök efnasambönd í völdum blöndunum einnig prófuð á jafnmörgum Aedes aegypti lirfum og fullorðnum.Samsetta hlutfallið er einn hluti LC50 skammtur af einu umsækjanda efnasambandi og hluti LC50 skammtur af hinu innihaldsefninu.Í lífgreiningu fyrir fullorðna virkni voru valin efnasambönd leyst upp í leysinum asetoni og sett á síupappír sem var vafinn inn í 1300 cm3 sívalur plastílát.Asetonið var látið gufa upp í 10 mínútur og fullorðnum var sleppt.Á sama hátt, í lirfueyðandi lífgreiningunni, voru skammtar af LC50 efnasamböndum fyrst leystir upp í jöfnu rúmmáli af DMSO og síðan blandað saman við 1 lítra af vatni sem geymt var í 1300 cc plastílátum og lirfunum var sleppt.
Líkindagreining á 71 skráðum dánartíðni var gerð með SPSS (útgáfa 16) og Minitab hugbúnaði til að reikna út LC50 gildi.


Pósttími: júlí-01-2024