Innyflum leishmaniasis (VL), þekktur sem kala-azar á indverska undirheiminum, er sníkjusjúkdómur sem orsakast af flögguðu frumdýrinu Leishmania sem getur verið banvæn ef ekki er meðhöndlað strax. Sandflugan Phlebotomus argentipes er eini staðfesti smitberinn af VL í Suðaustur-Asíu, þar sem henni er stjórnað með leifarsprautun innandyra (IRS), tilbúið skordýraeitur. Notkun DDT í VL eftirlitsáætlunum hefur leitt til þróunar ónæmis í sandflugum, þannig að DDT hefur verið skipt út fyrir skordýraeitrið alfa-sýpermetrín. Hins vegar virkar alfa-sýpermetrín svipað og DDT, þannig að hættan á mótstöðu í sandflugum eykst við streitu af völdum endurtekinnar útsetningar fyrir þessu skordýraeitursefni. Í þessari rannsókn metum við næmni villtra moskítóflugna og F1 afkvæma þeirra með því að nota CDC flösku lífgreininguna.
Við söfnuðum moskítóflugum frá 10 þorpum í Muzaffarpur héraði í Bihar á Indlandi. Átta þorp héldu áfram að nota mikla virknisýpermetríntil úðunar innanhúss hætti eitt þorp að nota öflugt sýpermetrín til úðunar innanhúss og eitt þorp notaði aldrei öflugt sýpermetrín til úðunar innanhúss. Moskítóflugurnar sem safnað var voru útsettar fyrir fyrirfram skilgreindum greiningarskammti í tiltekinn tíma (3 μg/ml í 40 mínútur) og niðurskurðartíðni og dánartíðni voru skráð 24 klst. eftir útsetningu.
Drápstíðni villtra moskítóflugna var á bilinu 91,19% til 99,47% og af F1 kynslóðum þeirra var á bilinu 91,70% til 98,89%. Tuttugu og fjórum klukkustundum eftir útsetningu var dánartíðni villtra moskítóflugna á bilinu 89,34% til 98,93% og af F1 kynslóð þeirra var á bilinu 90,16% til 98,33%.
Niðurstöður þessarar rannsóknar benda til þess að ónæmi geti myndast hjá P. argentipes, sem bendir til þess að þörf sé á áframhaldandi eftirliti og árvekni til að viðhalda stjórn þegar útrýming hefur verið náð.
Visceral leishmaniasis (VL), þekktur sem kala-azar á Indlandsskaga, er sníkjusjúkdómur sem orsakast af flögguðu frumdýrinu Leishmania og smitast með biti sýktra kvenkyns sandflugna (Diptera: Myrmecophaga). Sandflugur eru eina staðfesta smitbera VL í Suðaustur-Asíu. Indland er nálægt því að ná því markmiði að útrýma VL. Hins vegar, til að viðhalda lágu tíðni eftir útrýmingu, er mikilvægt að draga úr smitferjustofninum til að koma í veg fyrir hugsanlega smit.
Flugaeftirlit í Suðaustur-Asíu er náð með leifarsprautun innanhúss (IRS) með tilbúnum skordýraeitri. Leynileg hvíldarhegðun silfurfóta gerir það að hentugu skotmarki fyrir skordýraeitursvörn með úðaleifum innandyra [1]. Afgangsúðun innanhúss á díklórdífenýltríklóretani (DDT) samkvæmt National Malaríuvarnaráætluninni á Indlandi hefur haft umtalsverð yfirfallsáhrif í stjórn moskítóstofna og dregið verulega úr VL tilfellum [2]. Þessi óskipulögðu stjórn á VL varð til þess að indverska VL útrýmingaráætlunin tók upp úðun innanhúss sem aðalaðferðin til að stjórna silfurfótum. Árið 2005 undirrituðu ríkisstjórnir Indlands, Bangladess og Nepal viljayfirlýsingu með það að markmiði að útrýma VL fyrir árið 2015 [3]. Tilraunir til útrýmingar, sem fólu í sér blöndu af eftirliti með smitferjum og hraðri greiningu og meðferð á tilfellum í mönnum, var stefnt að því að komast inn í samþjöppunarfasann fyrir árið 2015, markmið sem síðan var endurskoðað í 2017 og síðan 2020.[4] Nýi alþjóðlegi vegvísirinn til að útrýma vanræktum hitabeltissjúkdómum felur í sér útrýmingu VL fyrir árið 2030.[5]
Þegar Indland er komið inn í áfanga BCVD eftir útrýmingu er mikilvægt að tryggja að verulegt ónæmi gegn beta-sýpermetríni myndist ekki. Ástæðan fyrir ónæminu er sú að bæði DDT og cypermethrin hafa sama verkunarmáta, þ.e. miða á VGSC próteinið[21]. Þannig getur hættan á mótstöðumyndun hjá sandflugum aukist vegna streitu sem stafar af reglulegri útsetningu fyrir mjög öflugu cýpermetríni. Það er því brýnt að fylgjast með og bera kennsl á mögulega sandflugustofna sem eru ónæmar fyrir þessu skordýraeitursefni. Í þessu samhengi var markmið þessarar rannsóknar að fylgjast með næmnistöðu villtra sandflugna með því að nota greiningarskammta og váhrifalengd ákvörðuð af Chaubey o.fl. [20] rannsakaði P. argentipes frá mismunandi þorpum í Muzaffarpur héraði í Bihar á Indlandi, sem notuðu stöðugt úðunarkerfi innanhúss meðhöndluð með cypermethrin (samfelld IPS þorp). Næmni villtra P. argentipes frá þorpum sem höfðu hætt að nota cypermethrin-meðhöndluð úðunarkerfi innanhúss (fyrrum IPS-þorp) og þeirra sem aldrei höfðu notað cypermethrin-meðhöndluð úðunarkerfi innanhúss (ekki IPS-þorp) voru borin saman með því að nota CDC flösku lífgreininguna.
Tíu þorp voru valin fyrir rannsóknina (Mynd 1; Tafla 1), þar af átta með sögu um samfellda úðun innanhúss á tilbúnum pyrethroids (hypermethrin; tilnefnd sem samfelld hypermethrin þorp) og höfðu VL tilfelli (að minnsta kosti eitt tilfelli) á síðustu 3 árum. Af hinum tveimur þorpum sem eftir voru í rannsókninni var eitt þorp sem ekki innleiddi úðun innanhúss á beta-sýpermetríni (þorp sem ekki var úða innanhúss) valið sem viðmiðunarþorp og hitt þorpið sem var með hlé á úða innanhúss á beta-sýpermetríni (tímabundið úðunarþorp innanhúss/fyrrum úðunarþorp innanhúss) var valið sem viðmiðunarþorp. Val á þessum þorpum var byggt á samráði við heilbrigðisráðuneytið og úðateymi innanhúss og staðfestingu á öraðgerðaáætlun um úða innanhúss í Muzaffarpur héraði.
Landfræðilegt kort af Muzaffarpur héraði sem sýnir staðsetningar þorpanna sem rannsóknin tók til (1–10). Námsstaðir: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Kortið var útbúið með QGIS hugbúnaði (útgáfa 3.30.3) og Open Assessment Shapefile.
Flöskurnar fyrir útsetningartilraunirnar voru útbúnar samkvæmt aðferðum Chaubey o.fl. [20] og Denlinger o.fl. [22]. Í stuttu máli voru 500 ml glerflöskur útbúnar einum degi fyrir tilraunina og innri veggur flöskanna var húðaður með tilgreindu skordýraeitri (greiningarskammtur α-sýpermetríns var 3 μg/mL) með því að setja asetónlausn af skordýraeitrinu (2,0 ml) á botn, veggi og lok flöskunnar. Hver flaska var síðan þurrkuð á vélrænni rúllu í 30 mín. Á þessum tíma skaltu skrúfa hettuna rólega af til að leyfa asetoninu að gufa upp. Eftir 30 mínútur af þurrkun, fjarlægðu lokið og snúðu flöskunni þar til allt asetonið hefur gufað upp. Flöskurnar voru síðan látnar þorna yfir nótt. Fyrir hvert endurtekið próf var ein flaska, notuð sem viðmiðun, húðuð með 2,0 ml af asetoni. Allar flöskur voru endurnotaðar í gegnum tilraunirnar eftir viðeigandi hreinsun samkvæmt aðferð sem lýst er af Denlinger o.fl. og Alþjóðaheilbrigðismálastofnunin [22, 23].
Daginn eftir undirbúning skordýraeiturs voru 30–40 villt veiddar moskítóflugur (sveltar kvendýr) fjarlægðar úr búrum í hettuglösum og blásið varlega í hvert hettuglas. Um það bil sami fjöldi flugna var notaður fyrir hverja skordýraeiturhúðaða flösku, þar á meðal samanburðarhópinn. Endurtaktu þetta að minnsta kosti fimm til sex sinnum í hverju þorpi. Eftir 40 mínútna útsetningu fyrir skordýraeitrinu var fjöldi flugna slegnar niður. Allar flugur voru fangaðar með vélrænni sogvél, settar í lítra pappaílát þakin fínu möskva, og settar í sérstakan útungunarvél við sömu raka- og hitastig með sama fæðugjafa (bómullarkúlur í bleyti í 30% sykurlausn) og ómeðhöndluðu nýlendurnar. Dánartíðni var skráð 24 klukkustundum eftir útsetningu fyrir skordýraeitrinu. Allar moskítóflugur voru krufðar og skoðaðar til að staðfesta auðkenni tegunda. Sama aðferð var gerð með F1 afkvæmaflugurnar. Niðurföll og dánartíðni var skráð 24 klst. eftir útsetningu. Ef dánartíðni í samanburðarflöskunum var < 5% var engin leiðrétting á dánartíðni gerð í endurteknum. Ef dánartíðni í samanburðarflöskunni var ≥ 5% og ≤ 20%, var dánartíðni í prófflöskunum í þeirri eftirlíkingu leiðrétt með formúlu Abbotts. Ef dánartíðni í samanburðarhópnum fór yfir 20% var öllum prófunarhópnum hent [24, 25, 26].
Meðaldauði villtveiddra P. argentipes moskítóflugna. Villustikur tákna staðlaðar villur meðaltalsins. Skurðpunktur tveggja rauðu láréttu línanna við línuritið (90% og 98% dánartíðni, í sömu röð) gefur til kynna dánartíðni þar sem ónæmi getur myndast.[25]
Meðaldánartíðni F1 afkvæma villtveiddra P. argentipes. Villustikur tákna staðlaðar villur meðaltalsins. Kúrfurnar sem tvær rauðu láréttu línurnar skera (90% og 98% dánartíðni, í sömu röð) tákna svið dánartíðni þar sem ónæmi getur þróast [25].
Í ljós kom að moskítóflugur í þorpinu sem ekki er IRS (Manifulkaha) voru mjög viðkvæmar fyrir skordýraeitrunum. Meðaldánartíðni (±SE) villtveiddra moskítóflugna 24 klst. eftir rothögg og útsetningu var 99,47 ± 0,52% og 98,93 ± 0,65%, í sömu röð, og meðaldánartíðni F1 afkvæma var 98,89 ± 1,11% og 98,31% í sömu röð og 98,31 sek. 3).
Niðurstöður þessarar rannsóknar benda til þess að silfurfættar sandflugur geti þróað ónæmi fyrir tilbúnu pyrethroid (SP) α-cypermethrin í þorpum þar sem pyrethroid (SP) α-cypermethrin var notað reglulega. Aftur á móti reyndust silfurfættar sandflugur sem safnað var frá þorpum sem ekki falla undir IRS/eftirlitsáætlunina vera mjög næmar. Vöktun á næmi villtra sandflugnastofna er mikilvægt til að fylgjast með virkni skordýraeiturs sem notuð eru, þar sem þessar upplýsingar geta hjálpað til við að stjórna skordýraeiturþoli. Reglulega hefur verið greint frá miklu magni DDT viðnáms í sandflugum frá landlægum svæðum Bihar vegna sögulegs valþrýstings frá IRS með því að nota þetta skordýraeitur [1].
Við fundum að P. argentipes væri mjög næmur fyrir pyrethroids og vettvangsrannsóknir á Indlandi, Bangladess og Nepal sýndu að IRS hafði mikla skordýrafræðilega virkni þegar það var notað í samsettri meðferð með cypermethrin eða deltamethrin [19, 26, 27, 28, 29]. Nýlega hafa Roy o.fl. [18] greindi frá því að P. argentipes hefði þróað ónæmi fyrir pyrethroids í Nepal. Vettvangsnæmni rannsókn okkar sýndi að silfurfættar sandflugur sem safnað var frá þorpum sem ekki voru í snertingu við IRS voru mjög næmar, en flugur sem safnað var frá hléum/fyrrum IRS þorpum og samfelldum IRS þorpum (dánartíðni var á bilinu 90% til 97% nema sandflugur frá Anandpur-Haruni sem voru með 89,34% andlátstíðni) cýpermetrín [25]. Ein möguleg ástæða fyrir þróun þessa ónæmis er þrýstingurinn sem myndast af venjubundinni úðun innanhúss (IRS) og staðbundnum úðunarprógrammum, sem eru staðlaðar verklagsreglur til að meðhöndla kala-azar uppkomu á landlægum svæðum/blokkum/þorpum (Standard Operating Procedure for Break Investigation and Management [30]. Niðurstöður þessarar rannsóknar gefa því miður mjög árangursríkar vísbendingar um þróun þrýstings gegn þrýstingi, því miður. söguleg næmni fyrir þetta svæði, fengin með CDC flösku lífgreiningu, eru ekki tiltækar til samanburðar allar fyrri rannsóknir hafa fylgst með P. argentipes næmni með því að nota WHO skordýraeitur gegndreyptum pappír. styrkur sandfluga er óljós vegna þess að sandflugur fljúga sjaldnar en moskítóflugur og eyða meiri tíma í snertingu við undirlagið í lífgreiningunni [23].
Tilbúnir pyrethroids hafa verið notaðir í VL landlægum svæðum í Nepal síðan 1992, til skiptis við SPs alfa-cypermethrin og lambda-cyhalothrin til að stjórna sandflugum [31], og deltamethrin hefur einnig verið notað í Bangladesh síðan 2012 [32]. Svipgerðarviðnám hefur greinst í villtum stofnum silfurfættra sandflugna á svæðum þar sem tilbúnir pyrethroids hafa verið notaðir í langan tíma [18, 33, 34]. Stökkbreyting sem ekki er samheiti (L1014F) hefur fundist í villtum stofnum indversku sandflugunnar og hefur verið tengd viðnám gegn DDT, sem bendir til þess að pyrethroid ónæmi myndast á sameindastigi, þar sem bæði DDT og pyrethroid (alfa-cypermethrin) miða við sama gen í skordýrataugakerfinu [17, 34]. Þess vegna er kerfisbundið mat á næmi fyrir cýpermetríni og eftirlit með moskítóþoli nauðsynleg á meðan á útrýmingu og eftir útrýmingu stendur.
Hugsanleg takmörkun þessarar rannsóknar er að við notuðum CDC hettuglas lífgreiningu til að mæla næmi, en allur samanburður notaði niðurstöður úr fyrri rannsóknum með WHO lífgreiningarsettinu. Niðurstöður úr lífgreiningunum tveimur eru hugsanlega ekki sambærilegar með beinum hætti vegna þess að CDC hettuglas lífprófið mælir niðurbrot í lok greiningartímabilsins, en WHO Kit lífgreiningin mælir dánartíðni 24 eða 72 klukkustundum eftir útsetningu (síðarnefnda fyrir hægvirk efnasambönd) [35]. Önnur hugsanleg takmörkun er fjöldi IRS þorpa í þessari rannsókn samanborið við eitt non-IRS og eitt non-IRS/fyrrum IRS þorp. Við getum ekki gert ráð fyrir að næmni moskítóflugna sem sést í einstökum þorpum í einu umdæmi sé dæmigerð fyrir næmi í öðrum þorpum og hverfum í Bihar. Þar sem Indland er komið inn í áfanga hvítblæðisveiru eftir brotthvarf er mikilvægt að koma í veg fyrir verulega þróun ónæmis. Nauðsynlegt er að fylgjast hratt með mótstöðu í sandflugustofnum frá mismunandi héruðum, blokkum og landfræðilegum svæðum. Gögnin sem kynnt eru í þessari rannsókn eru bráðabirgðatölur og ætti að sannreyna þær með samanburði við auðkenningarstyrkinn sem Alþjóðaheilbrigðismálastofnunin hefur gefið út [35] til að fá nákvæmari hugmynd um næmnistöðu P. argentipes á þessum svæðum áður en áætlunum um eftirlit með smitferjum er breytt til að viðhalda lágum sandflugastofnum og styðja útrýmingu hvítblæðisveiru.
Moskítóflugan P. argentipes, smitberi hvítblæðisveirunnar, gæti byrjað að sýna snemma merki um ónæmi gegn hinu mjög árangursríka cýpermetríni. Reglulegt eftirlit með skordýraeiturþoli í villtum stofnum P. argentipes er nauðsynlegt til að viðhalda faraldsfræðilegum áhrifum inngripa gegn smitberum. Skipting skordýraeiturs með mismunandi verkunarmáta og/eða mat og skráningu nýrra skordýraeiturs er nauðsynleg og mælt með því til að stjórna skordýraeiturþoli og styðja við útrýmingu hvítblæðisveiru á Indlandi.
Pósttími: 17-feb-2025