Þróun áreiðanlegra og staðlaðra aðferða til að prófa næmi moskítóflugna fyrir skordýraeitri er lykilatriði til að skilja virkni nýrra virkra innihaldsefna eða efnasambanda. Aðferðir til að prófa næmi moskítóflugna fyrir snertiskordýraeitri eða vörum (eins og þær sem kynntar eru í lýðheilsuáætlunum) eru vel þekktar og staðlaðar. Hins vegar er erfitt að innleiða prófunaraðferðir fyrir rokgjörn eða úðaskordýraeitur sem notuð eru í heimilisvörum á skilvirkan hátt. Byggt á ráðleggingum Alþjóðaheilbrigðismálastofnunarinnar um skordýraeitur til heimilisnota þróuðum við staðlaða og afkastamikla aðferð til að prófa úðavörur með því að nota moskítóflugur í búrum og árangursríka sótthreinsunaraðferð sem framkvæmd var í Peet-Grady prófunarklefa (PG prófunarklefi). Við staðfestum virkni þessarar nýju aðferðar með því að nota stofna skordýraeitursónæma og næma Aedes og Anopheles moskítóflugur. Nýstárlegur eiginleiki þessarar aðferðar er að hún er með klefa sem beinist að moskítóflugnabúrunum, sem gerir kleift að meta magn moskítóflugudrápstíðni í rauntíma eftir útsetningu fyrir skordýraeitri. Sótthreinsun með strok fjarlægir á áhrifaríkan hátt leifar af úðaolíu sem inniheldur pýretróíð af yfirborði prófunarklefans, með dánartíðni undir 2% fyrir næmar moskítóflugur sem prófaðar voru beint á yfirborði klefans. Enginn staðbundinn misræmi í dráps- eða dánartíðni meðal moskítóflugna í búrum sást í PG klefanum. Tvöföld búraaðferð okkar veitir átta sinnum meiri afköst en frjáls flugaðferðin, sem gerir kleift að prófa mismunandi moskítóflugur samtímis og greina á skilvirkan hátt á milli viðkvæmra og ónæmra moskítóflugnastofna sem prófaðir eru samhliða.
Hingað til hafa skordýraeitur í úðabrúsa aðallega verið notuð á heimilum til persónulegrar varnar, en takmarkað í lýðheilsuáætlunum. Hins vegar hafa nýlegar rannsóknir sýnt fram á útbreidda notkun skordýraeiturs á heimilum á svæðum þar sem sjúkdómar sem berast með vektorum eru algengir. Hvort sem ástæðan er moskítóflugnafæla eða sjúkdómavarnir, þá er brýn þörf á stöðluðum og auðveldum í notkun aðferðum til að skima fyrir næmi landlægra moskítóflugna fyrir skordýraeitri á heimilum. Þetta er mikilvægt til að spá fyrir um virkni skordýraeiturs gegn staðbundnum vektorum og skilja hvernig notkun skordýraeiturs á heimilum hefur áhrif á þróunarval á ónæmi fyrir skordýraeitri.
Viðbótaraðferð 1 veitir ítarlegar leiðbeiningar skref fyrir skref um framkvæmd úðaprófunaráætlunar okkar fyrir skordýraeitur.
Þó að leiðbeiningar Alþjóðaheilbrigðismálastofnunarinnar (WHO) mæli með notkun sjálfvirkra úða, þá veita þær ekki sérstakar tæknilegar forskriftir. Notkun sjálfvirkra úða er mikilvæg, þar sem handvirk úðun í própýlen glýkólklefa er ekki aðeins vinnuaflsfrek heldur getur hún einnig valdið ósamræmi í rúmi og breytileika í lengd úðunar.
Sótthreinsa þarf hvarfklefann eftir hverja prófun, en aðferðin við að þrífa hann að innan sem mælt er með í leiðbeiningum Alþjóðaheilbrigðismálastofnunarinnar (WHO) felst í því að nota vatn úr slöngu. Í daglegu starfi okkar er þessi aðferð erfiðasta skrefið í notkun lífgreiningarbúnaðar, þannig að við þróuðum og prófuðum sótthreinsunaraðferð með strokum.
Fjarlægjanlegir hlutar viftunnar eru meðhöndlaðir eins og lýst er að ofan og blöð og rammi viftunnar eru hreinsaðir með svampi vættum í 5% lausn af Decon 90.
Byggt á sambandi milli úðunartíma og afhendingarhraða vörunnar, sýndi úðabrúsinn okkar einnig góða nákvæmni í að stjórna úðaskammtahlutfallinu, að minnsta kosti yfir prófaða sviðið 1 til 4 sinnum. Eins og sést á mynd 3b er þessi eiginleiki sérstaklega mikilvægur til að lýsa skammta-svörunarsambandi nýrra úðabrúsaformúla eða ákvarða auðkenningarskammt til að greina ónæmi gegn skordýraeitri.
Við sýnum fram á að endurskoðaða aðferð okkar til að meta skordýraeitur í úðabrúsum fyrir heimili, með því að nota sótthreinsun með úðabrúsum, tvöfalda búra, fjarstýrða úða og líffræðilega upptöku úr aðgerðamyndavélum, er áhrifaríkari og raunhæfari valkostur við núverandi notkun.WHOráðleggingar. Sótthreinsunaraðferðin með strokum, sem tekur aðeins 20 mínútur, sparar verulegan tíma samanborið við núverandi aðferð (sem tekur venjulega eina klukkustund á prófunarklefa). Hún dregur einnig úr þeim tíma sem rekstraraðilar eyða í að klæðast fullum persónuhlífum (t.d. öndunarhjálmum og vinnufatnaði með stöðurafmagnsvörn). Ennfremur myndar þessi aðferð minna af menguðum vökva og fatnaði til meðferðar en algjör hreinsun prófunarklefans, og lágmarkar þannig líkur á mengun í herberginu þar sem prófunarklefinn er staðsettur. Sótthreinsunaraðferðin með strokum hentar einnig til sótthreinsunar á hálf-varanlegum prófunarherbergjum sem krefjast...lágmarksstaðsetning húsgagna í fjölbreyttum herbergjaskipanum.
Lykilatriði sem skoðað er í þessari rannsókn og öðrum er stöðlun á útsetningarskömmtum skordýraeiturs sem notuð eru í umhverfinu í mismunandi prófunarferlum. Eins og sést á mynd 2b, þrátt fyrir fastan úðunartíma, var úðamagnið mismunandi eftir gerðum úðabrúsa, sem hugsanlega endurspeglar mismunandi framleiðsluferla (td innri þrýsting, notkun drifefnis, stútbyggingu o.s.frv.). Ennfremur takmarkar núverandi skortur á fjarstýrðum úðatækjum sem eru fáanleg á markaði með nauðsynlegan sveigjanleika í úðunartíma notkun þeirra við mat á skammta-svörunarsambandi fyrir moskítóflugueyðingu. Handvirk úðun í gegnum prófunarlúgur eða aðgangslúgur (ef þær eru tiltækar) getur leitt til breytinga á útsetningarskömmtum. Reyndar undirstrika niðurstöður okkar þörfina og mikilvægi þess að draga úr þessum breytileikauppsprettum. Fyrir ónæma Aedes aegypti stofna sáum við fylgni milli úðaskammts og lokaákvörðunar á næmi eða ónæmi (mynd 3b). Helst ætti að staðla úðaskammta í grömmum af úðaefni frekar en í lengd úðunar til að auðvelda samanburð milli mismunandi rannsókna.
RCAD býður upp á aðra nálgun fyrir framtíðarrannsóknir sem lágmarkar áhrif breytinga á ferlum. Þó að við höfum komist að því að stöðlun úðabrúsa sé ekki framkvæmanleg, sýndum við fram á að hægt er að áætla massa úðabrúsans sem dælt er í gegnum mismunandi úðabrúsa með því að kvarða úðalengdina (Myndir 2b, 3a). Slík stöðlun á úðabrúsaþéttni í hvaða prófunarklefa sem er er mikilvæg til að bæta endurtekningarhæfni niðurstaðna.
Byggt á reynslu okkar og reynslu annarra rannsóknarhópa, þá fela ráðleggingar í núverandi leiðbeiningum varðandi notkun úðagreiningaraðferða til að prófa frjálsfljúgandi moskítóflugur í sér verulegar áskoranir í skipulagningu fyrir rannsóknarstofur og rannsóknir á hálf-vettvangi. Til dæmis hafa aðferðir til að greina frjálsfljúgandi moskítóflugur mjög litla afköst (þar með talið vinnuaflsfrekar endurheimtar á lifandi frjálsfljúgandi moskítóflugum) og þjást af ýmsum tæknilegum takmörkunum, svo sem erfiðleikum við að ákvarða drephlutfall í rauntíma.
Þó að staðfest tilraun okkar með tvöföldu búri fjallar um takmarkanir á flæði og sé möguleg aðferð til að greina næmi moskítóflugna fyrir skordýraeitri í úðabrúsa, skal tekið fram að dánartíðni moskítóflugna á Cayman-eyjum var marktækt lægri í tilrauninni í búrinu en í tilrauninni þar sem þau fljúga frjálst (Mynd 5c, Tafla 1). Þessi munur gæti endurspeglað lækkun á skordýraeiturskammti inni í búrinu, þar sem færri dropar af úðabrúsa komast í gegnum möskvann og inn í búrið. Framtíðarrannsóknir gætu notað stærri möskva og búrhönnun með hærri loftflæðishraða (t.d. sívalningslaga hönnun) til að staðfesta frekar niðurstöðurnar sem fengust með mismunandi tilraunaaðferðum.
Birtingartími: 2. febrúar 2026